Problemas con PCR
Buenas tardes a toda la comunidad:
Es un gusto dirigirme a ustedes, ojalá que alguien me pueda echar la mano con una duda.
Desde hace tiempo estoy trabajando en el aislamiento de clonas en un banco genómico, los escrutinios los realizo por dilución, es decir hago sulcultivos del banco, purifico el plásmido y hago PCR, los subcultivos que me dan amplificación los vuelvo a diluir y a correr PCR, así me voy hasta hacer unas cinco diluciones, para finalmente plaquear para analizar las clonas por restricción y pueda mandar a secuenciar.
Lo malo que desde un inicio tuve problemas, ya que a medida que voy diluyendo el banco (que se supone que le quito ruido) y las bandas de PCR deben salir más intensas, a veces no obtengo producto.
Gracias por su ayuda
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